ㄧ‧粒子在電泳槽中的速度
(1) 粒子本性：黏滯性，粒子大小，帶電荷量
(2) 外界條件：外加電場，膠體孔徑大小，溫度
二‧電泳介紹
(1) 電泳的演進：電泳的演進：濾紙→薄片→膠體
最早→溶液中進行，但是擴散作用大，不適合→改用噴溼的濾紙：附著力太強→容易造成蛋白質變性
(2) 膠體電泳：常用的有agarose(DNA實驗的那個)，PAGE(最常用的膠體)
(3) PAGE：
(a) 鑄膠反應：如何製造膠體→原料：單體，bridge(雙單體形成的架構)，催化劑，free radical generator(製造自由基)
流程：單體因為free radical generator而游基化，並串聯成一個大分子。接著使用bridge，可以讓這些長鏈大分子構成立體的結構
(b) 特性：孔洞大小與濃度有關(濃度越大，孔越小)；電中性且親水性
(c) 電泳的方式：可以分成兩種native與SDS兩種
Native→直接將sample注入膠體中，過成會受到粒子大小，帶電荷等因素→蛋白質仍能維持其活性
SDS→sample加上一層SDS(介面活性劑)→蛋白質發生變性，但是能夠讓所有sample的帶電荷相同
(d) 應用：
a. IEF：利用蛋白質等電點(pI)的特性來跑電泳。蛋白質在不同的環境下，會帶有不同的電荷。當pI=pH時，蛋白質不帶電；pI>pH時，帶正電。應用此特性，我們在膠體中加入Ampholyte →pH的濃度梯度→當蛋白質泳動至pH=pI(等電點)時→蛋白質不帶電，停下來→產生帶狀分布
b. 二維電泳：先跑IEF，並進行一次SDS→能夠依照分子量繪成蛋白質圖譜
三‧毛細管電泳
1‧原理：
※利用兩種泳流模式，以帶動分析物的移動
(1) electroosmosis flow(EOF)：電滲流
a. 來源：fused silica遇到水溶液後帶有負電，會吸引陽離子→形成電雙層→造成zeta potential(管壁到中央的電位差)
b. 電雙層分成所謂的rigid layer以及diffuse layer兩層，當外接施予電場時，diffuse layer會往負極前進，拉動整個流體的運動→電滲流
c. 電滲流速度很快，且會有平面流型的狀況產生，與壓力流的狀況不同
(2) electrophoretic mobility：電泳流→受到電荷等因素的泳洞
(3) 結合上述兩種泳動→分析物的泳動→但因為EOF很強，所有物質都會往負極 前進
2‧種類：
(1) CZE：緩衝液成分維持恆定→進行電泳→正離子最快，中性離子隨著EOF，陰離子則逆著電場跑，時間最久
(2) MEKC：膠束電動層析：
加入介面活性劑→超過CMC→形成micelle，表面帶有負電→於是Buffer中含有aqueous 與micelle兩個phase→樣品會在兩者間進行distribution→不同的泳動速度。因為這些Micelle很像stationary phase又稱pseudostationary phase
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